血液样品采集与抗凝

一、血液样品采集

1.采血部位

血液学检查首选的血源为静脉血，犬、猫常用的采血部位是前肢的头静脉、后肢的隐静脉和颈静脉等。兽医临床中常见动物可用的采血部位见下表。

2.采血时的保定

采血前，根据犬、猫的体形、性情温顺程度采用合适的保定方式，原则是尽量减少对犬、猫的应激。宠物应激往往会造成样品结果误差。

颈静脉采血/注射保定法

资源描述：保定者站于犬右(左）侧。左（右）臂跨过犬左（右）侧颈部，将其夹于腋下，手托住犬下颌，上仰头颈，右（左）手握住两前肢腕部，向下拉直，使颈部充分显露。 文件来源：石冬梅，蔡友忠主编，宠物临床诊疗技术

头静脉采血/注射保定法

资源描述：左（右）手托住犬下颌或用臂搂住颈部，以固定头颈。右（左）臂跨过犬右（左）侧，身体稍偎依犬背，肘部支撑在诊疗台上，利用前臂和肘部夹持犬身，控制犬移动。然后，手托住犬肘关节前移，伸直前肢，再用食指和拇指横压近端前臂部背侧或全握前臂部，使静脉怒张。 文件来源：石冬梅，蔡友忠主编，宠物临床诊疗技术

3.器材

目前，宠物临床上常用的采血器具是一次性注射器和头皮针，应根据采血量的需要来选取合适型号的注射器。

最好的采血工具是真空采血系统，它是由1个针头、1个持针器和1个采集管组成。采集管有不同的大小，根据需要采集管中会含有抗凝剂，应采集适量的血液以保证抗凝剂和血液成最佳比例。

4.采血方法

• 将前肢头静脉或后肢隐静脉的向心端用止血带扎紧或者用手握住，使静脉怒张；
• 消毒：用酒精棉擦拭采血部位进行消毒；
• 待酒精挥发后，用右手持注射器或头皮针使针头与皮肤呈30°～45°。刺入皮肤和血管，如见回血则减小针头与皮肤夹角（挑针），并将针头稍向前移动，松开止血带，并用右手缓缓向后抽取活塞，采集所需的血量。

犬静脉穿刺

资源描述：针头与皮肤呈30°～45°刺入皮肤和血管，如见回血则减小针头与皮肤夹角（挑针）并稍向前移动，松开止血带。 文件来源：石冬梅，蔡友忠主编，宠物临床诊疗技术

 二、血液样品抗凝及常用抗凝剂

血液检查多用抗凝血，血液样品采集后要尽快和抗凝剂混合，摇动时要轻柔，以防红细胞发生溶血而影响分析结果的准确性。

抗凝剂是加入血液样品中防止或延缓其凝集的化学物质。目前，宠物临床上常用的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸（EDTA）、草酸盐和柠檬酸盐、氟化钠等。

1.肝素

肝素是最适合血液化学分析的抗凝剂，主要作用机理是通过阻止凝血过程中凝血酶原向凝血酶转化而发挥作用。其优点是：

• 抗凝能力强；
• 不影响血细胞体积；
• 不引起溶血。

因肝素内含有钠盐、钾盐、锂盐或铵盐制剂，可引起白细胞凝集和干扰白细胞正常着色，不可用于血涂片的分类计数。

通常肝素钠粉剂（每毫克含肝素100～125U配成1 g/L溶液，取0.5 ml放入小瓶中，37～50℃烘干后，可抗凝5 ml血液。

2.乙二胺四乙酸（EDTA）

EDTA是血液学检查的首选，因为其不改变细胞形态，主要是通过与钙形成不溶的复合物而阻止血液凝固，因此不可用于血钙、钠及含氮物的测定。

将其配成100 g/L（10%）溶液，每2滴可使5 ml血液抗凝。一般商品化的真空管内含有适量的EDTA，过量的EDTA可造成细胞收缩，用自动分析仪进行细胞计数时造成结果无效。

3.草酸盐和柠檬酸盐

草酸盐（如草酸钠、草酸钾、草酸铵）主要通过与钙形成不溶性复合物而阻止血液凝固，因此不能用于血细胞比容和红细胞形态学测定，也不能用于血钾和血钠的测定。

1mL血液用2mg草酸盐即可抗凝。常用的草酸盐为草酸钾、草酸钠等，配成10%溶液，根据抗凝血量加入试管或玻瓶中，置45~55℃（不超过80℃）烘箱内烤干备用。

4.柠檬酸盐（枸橼酸盐）

一般用柠檬酸钠（也叫枸橼酸钠）。次抗凝剂可与血液中钙离子形成非离子化的可溶性钙化合物而起抗凝作用，溶解度和抗凝度较弱，5mg可抗凝1mL血液。使用时配成3.8%溶液，0.5mL可抗凝5mL全血。

主要用于红细胞沉降速率的测定和输血，一般不作为生化检验的抗凝剂。

5.氟化钠

氟化钠也有抗凝剂的作用，主要作为葡萄糖防腐剂。作为抗凝剂时，每毫升血液应加入6～10 mg。

目前商品化的含适量氟化钠的真空采集管巳经上市，因氟化钠干扰许多项血清酶检测，不适合做血液生化分析时的血液抗凝剂。

三、血样的处理

如分离血清，应将全血采集在试管中（不加抗凝剂），在室温下或25~37℃温水中斜置，血清析出后即可分离。血浆应在抗凝血采集后离心分离。

血液采集后应尽快送检和检测。不能立即送检的血样，血片应固定，抗凝血、血浆和血清应冷藏。送检血样应编号，并避免剧烈振摇。血液学检查项目与血样保存的期限见下表。