宠物病料的采集、包装与送检
| 准备工作 |
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训练目标：结合病例诊断工作，学会被检宠物病料的采取、保存、包装和记录的方法。 设备材料：
场地：传染病实验室、宠物医院。 |
1.病料的采取
（1）剖检前检查
发现犬急性死亡且天然孔出血时，先用显微镜检查其末梢血液抹片中是否有炭疽杆菌存在。如疑为炭疽，则不可随意剖检，只有在确定不是炭疽时方可进行剖检。
（2）取材时间
内脏病料的采取，必须死亡后立即进行，夏天不宜迟于6～8hr，冬天不迟于24hr，否则时间过长，有肠内细菌侵入，易使尸体腐败，影响病原微生物的检出。
取得病料后，应立即送检。如不能立刻进行检验，应迅速存放于冰箱中。若需要采血清测抗体，最好采发病初期和恢复期两个时期的血清。
（3）器械的消毒
- 刀、剪、镊子、注射器、针头等煮沸消毒30min。
- 器皿（玻璃制品、陶制品、珐琅制品等）可用高压灭菌或干烤灭菌。
- 软木塞、橡皮塞置于0.5%石炭酸水溶液中煮沸10min。
采取一种病料，使用一套器械和容器，不可混用。
（4）病料的采取
应根据不同的传染病，相应的采取该病常侵害的脏器或内容物。如：
- 败血性传染病可采取心、肝、睥、肺、肾、淋巴结、胃、肠等；
- 肠毒血症采取小肠及其内容物；
- 有神经症状的传染病采取脑、脊髓等。
如无法估计是哪种传染病，可进行全面采取。
检查血清抗体时，采取血液，凝固后析出血清，将血清装入灭菌小瓶送检。为了避免杂菌污染，病变检查应待病料采取完毕后再进行。
各种组织及液体的病料采取方法如下：
①内脏及淋巴结
将淋巴结、肺、肝、睥及肾等有病变的部位各采取1～2cm3的小方快，分别置于灭菌的试管或平皿中。若为供病理组织切片的材料，应将典型病变部分及相连的健康组织一并切取，组织块的大小每边约2cm左右，同时要避免金属器械，尤其是当病料供色素检查时更应注意。
②液体性病料
脓汁：用灭菌的注射器或吸管抽取或吸出脓肿深部的脓汁，置于灭菌试管中。若为开口的化脓灶或鼻腔时，则用无菌棉签浸蘸后，放在灭菌的试管中。
血清：以无菌操作吸取血液10ML，置于灭菌试管中，待血液凝固（经1～2hr）析出血清后，吸出血清置于另一灭菌试管中，如供血清学反应时，可于每毫升中加入5%的石炭酸水溶液1～2滴。
全血：采取10ML全血，立即注入盛有5%柠檬酸钠1ML的灭菌试管中，搓转混合片刻后即可。
心血：心血通常在右心房处采取，先用烧红的铁片或刀片烙烫心肌表面，然后用灭菌的尖刃外科刀自烙烫处刺一小孔，再用灭菌吸管或注射器吸出血液，盛于灭菌试管中。
乳汁：乳房先用消毒药水洗净（取乳者的手亦应先消毒），并把乳房附近的毛用消毒液刷湿，最初所挤的乳汁弃去，然后再采集5ML乳汁于灭菌试管中。若仅供显微镜直接染色检查，则可于其中加入0.5%的福尔马林溶液。
胆汁：先用烧红的刀片或铁片烙烫胆囊表面，再用灭菌的吸管或注射器刺入胆囊内吸取胆汁，盛于灭菌的试管中。
③肠
用烧红的刀片或铁片将欲采取的肠表面烙烫后穿一小孔，持灭菌棉签插入肠内，以便采取肠管黏膜或其内容物；亦可用线扎紧一段肠管（约6cm）两端，然后将两端切断，置于灭菌的器皿内。
④皮肤
取大小约10cm×10cm的皮肤一块，保存于30%甘油缓冲溶液中，或10%饱和盐水溶液中，或10%福尔马林溶液中。
⑤胎儿
将流产后的整个胎儿，用塑料薄膜、油布或数层不透水的油纸包紧，装入木箱内，立即送往实验室。
⑥小宠物
将整个尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或油布中，装入木箱内，送往实验室。
⑦骨
需要完整的骨头标本时，应将附着的肌肉和韧带等全部除去，表面撒上食盐，然后包于浸过5%石炭酸水或0.1%升汞溶液的纱布或麻布中，装于木箱内送往实验室。
⑧脑、脊髓
如采取脑、脊髓作病毒检查，可将脑、脊髓浸入50%甘油盐水液中或将整个头部割下，包入浸过0.1%升汞液的纱布或油布中，装如入木箱或铁桶中送检。
⑨粪尿
以清洁玻璃棒蘸新鲜粪便少许,置小瓶内，或用棉拭子自直肠内取少许。用导尿管无菌采取尿液10～20ML，立即送检。
⑩供显微镜检查用的脓汁、血液及黏液
可用载玻片制成抹片，组织块可制成触片，然后在两块玻片之间靠近两端边沿处各垫一根火柴棍或牙签，以免抹片或触片上的病料互相接触。如玻片有多张，可按上法依次垫火柴棍或牙签重叠起来，最上面的一张的玻片上的涂、抹面应朝下，最后用细线包扎，玻片上应注明编码，并另附说明。
2.病料的保存
病料采取后，如不能立即检验，或需送往有关单位检验，应当加入适当的保存剂，使病料尽量保持新鲜状态。
（1） 细菌检验材料的保存
将采取的脏器组织块，保存于饱和的氯化钠溶液或30%甘油缓冲盐水溶液中，容器加塞封固。如系液体，可装在封闭的毛细玻管或试管运送。
饱和氯化钠溶液的配制法：蒸馏水100ML，氯化钠38～39g，充分搅拌溶解后，用数层纱布过滤，高压灭菌后备用。
30%甘油缓冲溶液的配制法：中性甘油30ML，氯化钠0.5g，碱性磷酸钠1.0g，加蒸馏水至100ML，混合后高压灭菌备用。
（2） 病毒检验材料的保存
将采取的脏器组织块，保存于50%甘油缓冲盐水溶液或鸡蛋生理盐水中，容器加塞封固。
50%甘油缓冲盐水溶液的配制法：氯化钠2.5g，酸性磷酸钠0.46g，碱性磷酸钠10.74g，溶于100ML中性蒸馏水中，加纯中性甘油150ML，中性蒸馏水50ML，混合分装后，高压灭菌备用。
鸡蛋生理盐水的配制法：先将新鲜的鸡蛋表面用碘酒消毒，然后打开将内容物倾入灭菌容器内，按全蛋9份加入灭菌生理盐水1份，摇匀后用灭菌的纱布过滤，再加热至56～58℃ 持续30min，第二天及第三天按上法再加热一次，即可应用。
（3）病料组织学检验材料的保存
将采取的脏器组织块放入10%福尔马林溶液或95%酒精中固定；固定液的用量应为送检病料的10倍以上。如用10%福尔马林溶液固定，应在24hr后换新鲜溶液一次。严寒季节为防病料冻结，可将上述固定好的组织块取出，保存于甘油和10%福尔马林等量混合液中。
3.病料的包装和运送
病料送往检验室时，在病料容器一一标号，详加记录，附病料送检单，该单要复写三份，一份留为存根，两份寄往检验室，待检查完毕，退回一份。
液体病料最好收集在灭菌的细玻璃管中，管口用火焰封闭，注意勿使管内病料受热。将封闭的玻璃管用废纸或棉花包装，装入较大的试管中，再装在木盒中运送。用棉签蘸取的鼻液及脓汁等物，可置于灭菌的试管中，剪取多余的签柄，严密加封，用蜡密封管口，再装入木盒内寄送。
盛装组织或脏器的玻璃容器，包装时力求细致而结实，最好用双重容器。将盛材料的器皿和塞用蜡封口后，置于内容器中，内容器中衬垫缓冲物（如棉花、碎纸等）。
当气候温暖时，须加冰块，没有冰块时加冷水和等量的硫酸铵搅拌，使之迅速溶解，可使水温降至零下。再将内容器置于外容器中，外容器内应置于废纸、木屑、石灰粉等，再将外容器密封好。内外容器中所加缓冲物之量，以盛病料的容器万一破碎时能完全吸收其液体为度。外容器上需注明上下方向，写明“病理材料”、“小心玻璃”标记。也可用广口保暖瓶盛装病料寄送。
当怀疑为危险传染病（炭疽、禽流感）的病料时，应将盛病料的器皿于金属匣内，将匣焊封加印后装入木匣寄送。
病料装入容器内至送到检验部门的时间越快越好。途中避免接触高热及日光，避免振动、冲撞，以免腐败或病原菌死亡。远途可航空托运，电告检验单位即时提取。血清学和病理组织学检验材料，可妥善包装后邮寄。
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